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產品分類簡要描述:規(guī)格:50ml/100ml,價格:140/245元 上海一基實業(yè)有限公司主要從事實驗室設備,免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。
規(guī)格:50ml/100ml,價格:140/245元,產品簡介
ECL化學發(fā)光試劑盒用于Western blot的化學發(fā)光檢測,比DAB顯色的靈敏度至少高50倍,可達ng水平。原理是采用新型發(fā)光底物(Luminol),可與二抗上耦連的辣根過氧化物酶發(fā)生化學反應,發(fā)出熒光,從而可以通過用X光片壓片或其它適當熒光成像設備檢測樣品。在電泳的過程中,將復雜的蛋白混合物經SDS-PAGE分離,并轉移到固相膜上(如PVDF、NC)等,經辣根過氧化物酶(HRP)標記的二抗與膜上的蛋白直接反應。當加入ECL化學發(fā)光試劑后,Luminol發(fā)生氧化降解,并發(fā)射波長為428nm的光,此光可經X光片(放射自顯影片)感光記錄下來。
試劑盒組份
存儲溫度
A液 (避光) 25 mL 50mL 4℃
B 液 25 mL 50mL 4℃
試劑盒以外自備儀器和試劑
鑷子,1.5ml離心管,X光片,暗盒,顯影液,定影液、去離子水
操作步驟
1、 按照常規(guī)的Western實驗步驟進行操作到二抗孵育和洗滌后的膜待用。2、 ECL工作液的配制: 取1.5ml的eppendorf管,加入500μL A液和500μL B 液,混勻后即為ECL工作液(配制后請盡快使用)。3、 用平頭鑷將膜取出,用吸水紙略吸去過多的液體(切勿接觸膜的蛋白面),然后置于一潔凈保鮮膜上。4、 根據膜的大小,按每10平方厘米膜加1ml ECL工作液的比例,滴加ECL工作液到膜上,確保使工作液均勻覆蓋在膜上,放置1-2分鐘。 5、取膜,棄ECL工作液,用吸水紙略吸去過多的液體。將膜放在兩片保鮮膜中間,小心趕盡氣泡。 6、將膜固定于片夾內。暗室內壓片1分鐘,立即顯影定影,根據結果再調整壓片時間?;蛑苯臃謩e壓片30秒,1,3,5分鐘,然后一起顯影定影觀察結果。
保存條件
4℃避光保存,一年有效。
注意事項
1、 A液和B液在吸取過程中必須要更換槍頭,A液和B液相互污染后會導致A液或B液逐漸失效,影響后續(xù)的使用效果。2、 各溶液使用后,請蓋緊瓶蓋,以防失效。特別是B液,含有氧化劑,比較容易被還原而失效。3、 A液和B液均對人體有害,操作時請注意適當防護。4、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。